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发表日期:2015-08-12  果茶中展青霉素的测定

果茶中展青霉素的测定


一.仪器

  高效液相色谱仪,紫外检测器;离心机旋转蒸发仪;K-D浓缩器。

二.试剂

  展青霉素贮备液:精确称取霉素10.0g,用甲醇溶解,并定容至10.0mL,此液每毫升含1mg展青霉素。

  展青霉素标准使用液:将展青霉素标准贮备液用甲醇稀释成含展青霉素0.5μg/mL、1.0μg/mL、1.5μg/mL、2.0μg/mL、2.5μg/mL的标准系列溶液。

三.实验步骤

  1.样品的处理

  取取试样5g于25mL具塞离心管中,加入10mL乙酸乙酯振摇2min,超声萃取5min,1500r/min离心5min,用滴管吸取有机溶剂于125mL分液漏斗中(再重复上述萃取2次,每次加入乙酸乙酯5mL)。于分液漏斗中加入1mL 2%Na2CO3溶液,振荡2min,静置分层后弃去Na2CO3层,再重复上述操作2次。有机相经盛有1g无水Na2SO4的漏斗滤入K-D浓缩器中,N2气流下50℃蒸干,用甲醇定容至0.5mL供HPLC进样用。

  2.高效液相色谱参考条件 

  ① 色谱柱:ZobaxC4.6mm(内径)×200mm,5μm。

  ② 柱温:35℃。

  ③ 流动相:乙腈+水(5+95)。

  ③ 流速:1.0mL/min。

  ④ 检测波长:275nm。

  3.校正曲线的绘制

  分别进展青霉素标准系列溶液10μL,以不同浓度展青霉素对峰高值制成校正曲线。

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